Ein Kubikzentimeter der Substanz wird im Reagenzglas mit 2 ml frisch zubereiteter 24%iger Salpetersäure versetzt und erhitzt. Zum sicheren Nachweis verwendet man konzentrierte Salpetersäure. Beim Vorhandensein von aromatischen Eiweißen verfärbt sich die Lösung gelblich. 

Aromatische Eiweiß-Moleküle wie L-Phenylalanin oder L-Tyrosin besitzen einen Benzolring. Die Eiweiße kommen vor allem in der Milch und im Käse vor. Bei der Zugabe von Salpetersäure findet eine Nitrierung am Benzolring statt, wobei eine gelbe Nitroverbindung entsteht. Dabei wird ein Wasserstoff-Atom durch die NO₂-Gruppe (aus der Salpetersäure) substituiert. Aus diesem Grund verfärbt sich die Haut beim Kontakt mit konzentrierter Salpetersäure gelblich, da die Haut-Epidermiszellen aromatische Eiweiße enthalten. 

Salpetersäure ist ätzend und wirkt stark oxidierend. Es müssen Schutzbrille und Schutzhandschuhe getragen werden. Das Arbeiten erfolgt im Abzug. Führen Schüler diese Probe durch, darf nur mit verdünnter Salpetersäure gearbeitet werden.

GBU Deutschland  Experimente mit Salpetersäure   docx   pdf
SB Schweiz  Experimente mit Salpetersäure   docx   pdf